条斑紫菜蛋白酶解产物中α-葡萄糖苷酶抑制剂纯化及特性

天然产物研究与开发 ›› 2014, Vol. 26 ›› Issue (9): 1463-1468.

条斑紫菜蛋白酶解产物中α-葡萄糖苷酶抑制剂纯化及特性

周锋，刘冬冬，周楠迪，田亚平*

江南大学工业生物技术教育部重点实验室，无锡214122

出版日期:2014-09-30 发布日期:2014-11-02

Purification and Characterization of α-Glucosidase Inhibitor from Proteolytic Product of Porphyra yezoensis

ZHOU Feng, LIU Dong-dong, ZHOU Nan-di, TIAN Ya-ping*

Key Laboratory of Industrial Biotechnology,Ministry of Education,Jiangnan University,Wuxi 214122,China

Online:2014-09-30 Published:2014-11-02

摘要/Abstract

摘要： 以α-葡萄糖苷酶抑制活性为指标，优选出1398中性蛋白酶、碱性蛋白酶和氨肽酶在一定条件下复配酶解条斑紫菜蛋白制备α-葡萄糖苷酶抑制剂。酶解液加入乙醇至终浓度为60%以沉淀去除多糖，上清液为α-葡萄糖苷酶抑制剂粗品。该粗品利用SP Sepharose High Performance阳离子交换层析、Sephadex G-10凝胶层析和Mono Q阴离子交换层析进行分离纯化，获得一种肽类α-葡萄糖苷酶抑制剂（LGI）。LGI经反向高效液相层析测定纯度为62.4%，基本特性分析显示其具较好的温度和pH稳定性，对α-葡萄糖苷酶半抑制浓度IC₅₀值为97.36 μg/mL，属于一种非竞争性抑制剂。

关键词: 条斑紫菜, 蛋白酶水解, &alpha, -葡萄糖苷酶抑制剂, 纯化, 基本特性

Abstract: In this study,combined proteolyzation of Porphyra yezoensis by 1398 neutral protease,alkaline protease and aminopeptidase was optimized using the α-glucosidase inhibitor activity as index.The α-glucosidase inhibitor from hydrolysate was initially extracted by adding 60% ethanol to precipitate and remove polysaccharides.The supernatant was further purified through SP Sepharose High Performance cation-exchange chromatography,Sephadex G-10 gel filtration chromatography and Mono Q anion exchange chromatography.The purity of the obtained peptide-type α-glucosidase inhibitor (LGI) was up to 62.4%,according to the result of reverse-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC).The basic characteristics of LGI indicated that it had high thermo stability and pH stability.The IC₅₀ value of LGI was 97.36 μg/mL against α-glucosidase,and it belonged to non-competitive inhibitors.

Key words: Porphyra yezoensis, protease hydrolysis, &alpha, -glucosidase inhibitor, purification, basic characteristics

中图分类号:

Q946.1 TS254.9

周锋，刘冬冬，周楠迪，田亚平*. 条斑紫菜蛋白酶解产物中α-葡萄糖苷酶抑制剂纯化及特性[J]. 天然产物研究与开发, 2014, 26(9): 1463-1468.

ZHOU Feng, LIU Dong-dong, ZHOU Nan-di, TIAN Ya-ping*. Purification and Characterization of α-Glucosidase Inhibitor from Proteolytic Product of Porphyra yezoensis[J]. NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT, 2014, 26(9): 1463-1468.

[1]	刘艳芳, 李晓栋, 尹秀丽, 李可. 仿刺参内脏的化学成分研究[J]. 天然产物研究与开发, 2024, 36(2): 227-232.
[2]	刘婷婷. 水飞蓟宾的植物来源、提取方法和抗癌活性研究进展[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(增刊2): 154-163.
[3]	边雷, 梁雨晨, 沈彤. 油橄榄叶中黄酮类成分的研究[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(增刊1): 49-53.
[4]	叶明玉, 吕建华, 董婧, 李世玉, 王辛, 李长田. 真菌出芽短梗霉中一个新的酚苷类化合物[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(6): 966-972.
[5]	张俊焱, 李成慧, 左文明, 李锦萍, 刘力宽, 曾阳. 金露梅中一种α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取富集及活性研究[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(3): 460-466.
[6]	张宽朝, 徐晨阳, 余佳琪, 苏鸿呈, 徐忠有. 牡蒿总黄酮的提取、纯化及抗氧化活性分析[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(2): 281-290.
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[10]	邱倩倩, 王海燕, 孙建博, 路勇. 化妆品中功效生物碱提取纯化及功效评价的研究进展[J]. 天然产物研究与开发, 2022, 34(增刊2): 172-177.
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[14]	倪芹#, 李娜#, 朱宏涛, 赵平, 张颖君. 原花青素的化学结构及其分析技术研究进展[J]. 天然产物研究与开发, 2021, 33(增刊1): 151-164.
[15]	刘冬, 韩吉欣, 张云, 刘娟, 向育铭, 曹玉华. 白鲜皮多糖纯化、结构表征以及抗过敏研究[J]. 天然产物研究与开发, 2021, 33(10): 1627-1634.