天然产物研究与开发 ›› 2018, Vol. 30 ›› Issue (9): 1627-1633.doi: 10.16333/j.1001-6880.2018.9.026
郑荣1,2,3,何云富3,张邵博3,李倬3,冶眩青3,程浩3,丁功涛3,冯玉萍1,2,3,马忠仁1,2,3,李明生1,2,3*
ZHENG Rong1,2,3,HE Yun-fu3,ZHANG Shao-bo3,LI Zhuo3,YE Xuan-qing3,CHENG Hao3,DING Gong-tao3,FENG Yu-ping1,2,3,MA Zhong-ren1,2,3,LI Ming-sheng1,2,3*
摘要: 采用两种非动物源性蛋白酶水解大豆蛋白,以水解度为指标,对不同比例4种酶两两组合测试其水解度,选出水解最佳用酶;在单因素试验基础上,采用正交试验对酶解大豆蛋白的工艺条件进行优化,并将产物进行动物细胞的生长进行检测。结果表明:复合蛋白酶与碱性蛋白酶以等比例进行混合,其水解效果最佳;水解最佳工艺为:温度60 ℃、pH 值7.0 和酶/底物( E/S) = 1∶4(质量比),水解时间为4 h,其水解度为43.7%。将酶解产物培养BHK-21细胞,并与Hypep1510进行对比,细胞生长状态良好,其细胞密度在120 h时最大,为3.96×105 cells/mL,与Hypep1510相比,最大细胞密度并无明显差异,其倍增时间为26.2 h,高于阴性对照组与阳性对照组,且细胞形态基本未发生改变,表明酶解大豆蛋白所的产物能够缩短细胞倍增的时间,且具有一定的促细胞生长作用,为其在动物细胞大规模培养中的应用提供了理论依据。