天然产物研究与开发 ›› 2020, Vol. 32 ›› Issue (7): 1213-1218.doi: 10.16333/j.1001-6880.2020.7.017
阿依江·哈拜克,王晓梅,闫冬,李敏,帕丽达·阿不力孜*
AYIJIANG Ha-bai-ke,WANG Xiao-mei,YAN Dong,LI Min,PALIDA A-bu-li-zi*
摘要: 用靶向探针追踪淀粉样蛋白(Aβ25-35)的亚细胞定位情况,同时基于Nrf2信号通路探讨阿里红多糖组分(FOAPs-a)和(FOAPs-b)对Aβ25-35诱导的PC12细胞线粒体损伤通路的保护作用机制。采用40 μmol/L Aβ25-35诱导PC12细胞建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,将PC12细胞分为空白组、模型组(加40 μmol/L Aβ25-35)、阳性组(加50 μmol/L盐酸多奈哌齐)、不同浓度的FOAPs-a和FOAPs-b干预组(各 50、100、200 μg/mL)。以靶向探针追踪Aβ25-35在各组PC12细胞中的亚细胞定位情况;通过试剂盒检测PC12细胞中活性氧自由基ROS的变化情况;Western blotting法测定细胞凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的表达量以及和Nrf2通路相关的Nrf2、APK1和磷酸化的APK1蛋白的表达情况。结果发现,Aβ25-35处理PC12细胞会影响线粒体的完整性;在200 μg/mL FOAPs-a/b预处理PC12细胞后,能够显著缓解Aβ25-35对线粒体的损伤,同时使Aβ25-35的亚细胞共定位减弱;与空白组比较,模型组细胞中ROS含量增加,与模型组比较,FOAPs-a及FOAPs-b干预组均能降低ROS的沉积,差异有统计学意义;Western blotting结果显示:与模型组比较FOAPs-a及FOAPs-b均能减少APK1的磷酸化水平,上调Nrf2的蛋白表达水平。总之Aβ25-35可进入到PC12细胞的线粒体中引起其损伤,阿里红多糖组分能够通过激活Nrf2信号通路显著缓解Aβ25-35对PC12细胞线粒体的损伤。
中图分类号: R932