天然产物研究与开发 ›› 2021, Vol. 33 ›› Issue (11): 1936-1945.doi: 10.16333/j.1001-6880.2021.11.017
伊丽米热·吾甫尔1,库热西·玉努斯2,王志滨3,国鲁源1,吴桂霞1*
YILIMIRE·Wu-fu-er1,KUREXI·Yu-nu-si2,WANG Zhi-bin3,GUO Lu-yuan1,WU Gui-xia1*
摘要: 通过高效液相色谱法(HPLC)对昆仑雪菊总黄酮进行成分分析。利用网络药理学方法,构建“成分-靶点-通路”网络。基于预测结果,CCK8法检测不同浓度的昆仑雪菊总黄酮(Kunlun chrysanthemum total flavonoids,KCTF)对A549细胞的增殖抑制活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验观察KCTF对A549细胞迁移能力的影响。RT-qPCR检测Bax、Bcl-2和MMP-2基因的表达,Western blot检测相关凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果显示,HPLC分析获得68个KCTF成分,经筛选后得27个活性成分,通过相关数据库平台构建出KCTF干预非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)相关靶点217个,KEGG通路富集分析结果显示,KCTF干预NSCLC的关键节点主要被富集在细胞增殖、凋亡和周期调控、病毒致癌及其他肿瘤通路等76条信号通路。细胞水平验证实验结果表明,KCTF明显抑制了A549细胞的增殖,促进细胞的凋亡,抑制细胞的迁移;RT-qPCR实验验证了KCTF上调Bax的表达以及下调Bcl-2和MMP-2基因的表达;Western blot结果表明KCTF明显上调Bax/Bcl-2蛋白的表达,诱导了细胞的凋亡。综上,KCTF可通过多靶点、多途径实现干预NSCLC的作用,其抗肿瘤活性可能与影响凋亡基因Bax及Bcl-2的表达有关。
中图分类号: R285