荭草花醇提物对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用机制研究

doi:10.16333/j.1001-6880.2018.2.021

天然产物研究与开发 ›› 2018, Vol. 30 ›› Issue (2): 299-303.doi: 10.16333/j.1001-6880.2018.2.021

荭草花醇提物对H₂O₂诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用机制研究

刘亭1，吴琼1,3，刘香香1,3，陆定艳1,3，黄文炫1,3，李月婷1，李勇军2*

1贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室；2贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心，贵阳 550004；3贵州医科大学药学院，贵州贵阳 550025

出版日期:2018-02-28 发布日期:2018-02-28
基金资助:
国家自然科学基金（81560630；81760699）；贵州省科学技术厅人才团队项目（2016- 5613-5677）；贵州省教育厅项目（2013-04）

Protective Effect of Flowers of Polygonum orientale Flower Ethanol Extract on H₂O₂-induced Oxidative Stress Injury in H9c2 Cells

LIU Ting 1, WU Qiong 1,3, LIU Xiang-xiang1,3, LU Ding-yan1,3, HUANG Wen-xuan1, LI Yue-ting1, LI Yong-jun2* 

1Provincial Key Laboratory of Pharmaceutics in Guizhou Province,Guizhou Medical University; 2Engineering Research Center for the Development and Application of Ethnic Medicine and TCM,Ministry of Education,Guizhou Medical University,Guiyang 550004,Guizhou; 3College of Pharmacy,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,Guizhou

Online:2018-02-28 Published:2018-02-28

摘要/Abstract

摘要： 研究荭草花醇提物对H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用机制。采用200 μmol/L H₂O₂作用H9c2细胞0.5 h，建立H9c2细胞氧化损伤模型。将细胞分为正常对照组、H9c2细胞氧化损伤模型组、不同浓度荭草花醇提物（20、40、80 μg/mL）预处理组。采用MTS法检测细胞存活率；生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放量，细胞内丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力；Western blot测定cleavedcaspase-3、Bcl-2、Bax、p-AKT和AKT的表达。与模型组比较，荭草花醇提物能明显增加心肌细胞存活率，降低LDH释放量和MDA含量，提高SOD及CAT活性，并呈剂量依赖性抑制H₂O₂诱导的氧化应激损伤。荭草花醇提物下调cleaved caspase-3和Bax的蛋白水平，上调Bcl-2的表达，减少心肌细胞凋亡；增加细胞中p-AKT的表达，且这种表达可被PI3Ks抑制剂LY294002抵消。表明荭草花醇提物可减轻H₂O₂诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤，其机制可能与减少细胞凋亡，平衡氧化应激产物有关，且部分依赖于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K/Akt）通路。

关键词: 荭草花醇提物, 氧化应激损伤, H9c2心肌细胞, PI3K/Akt

Abstract: To investigate the protective effect of Polygonum orientale Flower Ethanol Extracton H₂O₂-induced Oxidative damage in H9c2 Cells.200 μmol/L H₂O₂ was used to induce the oxidativestress damage model in H9c2 cells for 0.5 h in vitro.The H9c2 cells were randomly divided into control group,the model group（200 μmol/L H₂O₂）and the Polygonum orientale Flower ethanol Extract different groups（20、40、80 μg/mL）.Cellviability was determined by MTS assay.Thecontentoflactate dehydrogenase (LDH),malondialdehyde (MDA) and the activities of superoxidedimutase (SOD) and catalase (CAT) were detected by biochemical kits.The protein levels of caspase-3,Bax,Bcl-2,p-AKT and AKT were detected by Western blot．Compared with model group, Polygonum orientale Flower Ethanol Extract pre-treatment improved cell viabilityand the activities of SOD and CAT in a dose-dependent manner,and attenuated leakage of LDH and content of MDA. Polygonum orientale Flower Ethanol Extract depressed myocardial apoptosis by down-regulating pro-apoptotic protein cleavedcaspase-3 and Bax,up-regulating apoptosis inhibitory protein Bcl-2 and increasing the protein level of p-AKT.LY294002 could offsets such an effect of Polygonum orientale Flower Ethanol Extract．In summary, Polygonum orientale Flower Ethanol Extract showed a protective effect on H₂O₂ -induced injury in H9c2 cells.This protection may result from inhibiting myocardial oxidative apoptosis,balancing the oxidative stress and maybe related with the PI3K/Akt signaling pathway.

Key words: Polygonum orientale Flower Ethanol Extract, oxidative stress injury, H9c2 cells, PI3K/Akt

中图分类号:

R96

刘亭1，吴琼1,3，刘香香1,3，陆定艳1,3，黄文炫1,3，李月婷1，李勇军2*. 荭草花醇提物对H₂O₂诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用机制研究[J]. 天然产物研究与开发, 2018, 30(2): 299-303.

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荭草花醇提物对H₂O₂诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用机制研究

Protective Effect of Flowers of Polygonum orientale Flower Ethanol Extract on H₂O₂-induced Oxidative Stress Injury in H9c2 Cells

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