天然产物研究与开发 ›› 2020, Vol. 32 ›› Issue (5): 820-825.doi: 10.16333/j.1001-6880.2020.5.014
史有阳,杨瑞,张洋,孙霃平*,刘胜
SHI You-yang,YANG Rui,ZHANG Yang,SUN Chen-ping*,LIU Sheng
摘要: 研究木犀草素(luteolin,Lut)抗H9c2心肌细胞损伤的作用及其机制。采用大鼠H9c2心肌细胞株,以1 μM阿霉素(doxorubicin,Dox)建立心肌细胞损伤模型,不同浓度Lut(5、10、20 μM)进行干预。细胞增殖法(MTT)检测细胞活力。通过高通量转录组测序筛选Lut(20 μM)改善H9c2心肌细胞损伤的靶点基因。利用分子克隆技术,将心肌细胞中线粒体延长因子1(mitochondrial elongation factor 1,MIEF1)表达抑制,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Lut对低表达MIEF1心肌细胞中MIEF1,Ser637位点磷酸化-Drp1(p-Drp1,Ser637),Caspase-3蛋白表达水平。与模型Dox组比较,Lut显著改善H9c2 细胞活力(P<0.05)。Dox组与正常组进行比较得到3 582个差异基因;Lut加Dox组与Dox组进行比较得到1 981个差异基因。利用小干扰RNA(siRNA)技术成功构建低表达MIEF1心肌细胞,Western blot 结果显示,Lut能够增加低表达MIEF1心肌细胞中MIEF1、p-Drp1(Ser637)蛋白表达水平(P<0.05),降低Caspase-3蛋白表达水平(P<0.05)。总之,Lut对H9c2心肌细胞的保护作用可能与促进MIEF1表达有关,本实验结果为Lut治疗阿霉素导致的心肌细胞损伤提供理论依据。
中图分类号: R966