天然产物研究与开发 ›› 2022, Vol. 34 ›› Issue (10): 1784-1793.doi: 10.16333/j.1001-6880.2022.10.017
周亚秋1,周红光1,2*
ZHOU Ya-qiu1,ZHOU Hong-guang1,2*
摘要: 基于网络药理学、分子对接及实验验证探讨蚕梅方(Canmei Decoction,CMF)治疗结直肠癌潜在的作用机制。通过TCMSP数据库、化学成分数据库、文献挖掘等方法收集CMF的活性成分,经ADME筛选获得候选靶点,利用UniProt数据库查询靶点蛋白对应的人类基因;通过GeneCards、OMIM数据库收集有关结直肠癌的靶点,抽取交集网络获得候选基因。利用STRING数据库构建交集靶点蛋白相互作用网络(PPI),选出关键靶点基因。将共同靶基因进行GO功能富集与KEGG通路分析。使用分子对接技术对化合物核心成分与关键靶点进行对接验证,并对核心化学成分进行实验验证。体外实验验证:采用MTT、Annexin V-FITC/PI双染法和Western blot法行体外实验验证不同浓度槲皮素对HCT116细胞的抑制率和凋亡相关蛋白表达水平的影响。实验得到CMF所含化合物对应靶点166个、结直肠癌对应靶点1 028个,两者交集的关键靶点79个。关键靶点GO富集条目中生物过程相关的条目1 609条,细胞组成相关的条目41条,分子功能相关的条目123条;关键靶点的KEGG富集通路涉及癌症通路、PI3K-Akt信号通路、IL-17信号通路、细胞转录、细胞凋亡等。分子对接结果显示CMF核心成分与结直肠癌关键靶点亲和力良好。细胞实验结果显示,不同浓度的槲皮素干预HCT116细胞后可显著抑制细胞增殖和促进细胞凋亡,降低抗凋亡蛋白Bcl-2表达、增加促凋亡蛋白BAX表达。综上结果表明,CMF防治结直肠癌的潜在作用机制可能与调控免疫炎症反应、细胞自噬、细胞增殖及凋亡等过程有关,具有多靶点、多途径、多系统的机制特点。
中图分类号: R961.1