摘要：
本研究从上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）和NLRP3通路角度研究藏红花素（crocin，CRO）治疗糖尿病肾病(diabetic kidney disease，DKD）的效果及作用机制。将60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周，随机选取10只作为正常组，采取正常饲养。其余小鼠接受高脂饮食继续喂养8周，之后链脲佐菌素造模并随机平均分为模型组、MCC950组（10 mg/kg MCC950，腹腔注射）、低剂量CRO组（5 mg/kg，灌胃）、中剂量CRO组（10 mg/kg，灌胃）、高剂量CRO组（20 mg/kg，灌胃）。治疗8周后，收集小鼠24 h尿液样本、血液样本、肾脏进行分析测定。采用试剂盒测定小鼠24 h尿蛋白定量（24 h-urine total protein，24 h-UTP）、血清肌酐（serum creatinine，Scr）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）评估其肾功能。对肾脏同一部位进行苏木素-伊红（hematoxylin-eosin，HE）、马松（Masson）染色，观察其病理学变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerasechain reaction，RT-qPCR）以及蛋白质印迹（Western blotting）检测EMT相关因子［上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin，E-cad）、波形蛋白（vimentin，VIM）、平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin，α-SMA）、转化生长因子-β（transforming growth factor beta，TGF-β）］表达情况以评估CRO对EMT的影响，检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白（NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3，NLRP3）相关因子［NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC）、半胱氨酸天冬氨酸酶1剪切体（cleaved-caspase-1）、白介素1β成熟体（mature-interleukin-1 beta，mature-IL-1β）、白介素18成熟体（mature-IL-18）］表达情况以评估CRO对NLRP3通路的影响。结果表明，与模型组相比，CRO治疗后，DKD小鼠Scr、BUN、24 h-UTP有不同程度降低，肾组织病理损伤有不同程度的好转，E-cad表达升高，VIM、α-SMA、TGF-β1表达降低，NLRP3、ASC、cleaved-caspase-1、mature-IL-1β、mature-IL-18表达下调。以上结果提示CRO可以通过抑制NLRP3通路抑制上皮细胞-间充质细胞转换EMT最终缓解DKD。
中图分类号:
R285.5
刘玉斌, 苏金浩, 陈 伟, 王 军, 及晓晖, 刘英凯, 王元松. 藏红花素调控NLRP3通路抑制上皮间质转化治疗糖尿病肾病的机制研究[J]. 天然产物研究与开发, 2024, 36(4): 589-596.
LIU Yu-bin, SU Jin-hao, CHEN Wei, WANG Jun, JI Xiao-hui, LIU Ying-kai, WANG Yuan-song. Mechanism of crocin in the treatment of diabetic kidney disease by inhibiting epithelial-mesenchymal transition through regulating NLRP3 pathway[J]. NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT, 2024, 36(4): 589-596.
