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1.
灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸调控PI3K/Akt/FoxO3a通路延缓衰老的作用机制研究
普元柱, 陈海丰, 苏 灿
天然产物研究与开发 2024, 36 (
5
): 737-747. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.5.001
摘要
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423
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研究灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸(caffeoylquinic acid from
Erigeron breviscapus
,EBCQA)的抗衰老作用,并探讨其潜在作用机制。以线虫为模型,观察EBCQA对其寿命、氧化抗性、热抗性、运动能力、DAF-16入核、以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响。腹腔注射
D
-半乳糖构建衰老大鼠模型,检测EBCQA对大鼠学习记忆能力、胸腺和脾脏系数、肝脏中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Akt/protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphp-Akt,p-Akt)、叉头框蛋白O3a(forkhead box class O3a,FOXO3a)、磷酸化FOXO3a(phosphp-FOXO3a,p-FOXO3a)表达,以及肝脏和血清中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量的影响。结果显示,EBCQA能够延长野生型线虫寿命,并提升其氧化抗性、热抗性和运动能力,但对线虫PI3K、Akt、FoxO3a同源体突变株寿命没有显著影响;EBCQA能促进DAF-16入核,通过DAF-16提升线虫的SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA水平。在
D
-半乳糖诱导衰老大鼠中,EBCQA给药显著改善大鼠的学习记忆功能,提升胸腺和脾脏系数,降低PI3K、Akt、p-Akt、p-FoxO3a表达和MDA含量,增强SOD、GSH-Px、CAT活性。以上结果表明,EBCQA具有延缓衰老的作用,其机制可能与抑制PI3K和Akt激活、降低FOXO3a磷酸化、促进FOXO3a入核和转录活性、提升抗氧化酶活性和抑制氧化应激相关。
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2.
黄精化学成分、药理作用研究进展及质量标志物(Q-Marker)预测分析
汪 成, 叶 菊, 何旭光, 唐媛媛
天然产物研究与开发 2024, 36 (
5
): 881-899. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.5.017
摘要
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403
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中药黄精为百合科、黄精属植物黄精
Polygonatum sibiricum
Red.、多花黄精
Polygonatum cyrtonema
Hua或滇黄精
Polygonatum kingianum
Coll.et Hemsl.的干燥根茎,用药历史悠久,性平、味甘,归脾、肺、肾经,具有养阴润肺、补脾益气、滋肾填精之功效,用于治疗肺虚燥咳、脾胃虚弱、体倦乏力、口干食少、精血不足、内热消渴等。本文对黄精的化学成分及现代药理研究进行综述,并基于其药理活性、药效物质、植物亲缘学、药材配伍、加工炮制和网络药理学等研究,预测分析了其质量标志物(quality markers,Q-marker)。初步确定黄芩素、甘草素、
β
-谷甾醇、薯蓣皂苷元、5,4′-二羟基黄酮、3′-甲氧基大豆苷、新甘草苷和黄精多糖为黄精的质量标志物,为黄精质量控制和临床用药提供参考依据。
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3.
基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学探究尖尾芋抗乳腺癌作用机制
王 鹏, 陈 娅, 彭兰淳, 郑青竹, 陈 厅, 彭江丽, 彭求贤
天然产物研究与开发 2024, 36 (
4
): 675-693. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.4.015
摘要
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304
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本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术、网络药理学策略探究尖尾芋石油醚部位抗乳腺癌药效物质基础及作用机制,并通过4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型验证尖尾芋石油醚部位(petroleum ether fraction of
Alocasia cucullata
,EAC)体内抗乳腺癌作用及机制。基于UPLC-Q-TOF-MS/MS数据获取EAC化学成分41个,包括11种芳香类成分、8种萜类成分、5种生物碱类成分、4种脂肪酸类成分、2种香豆素类成分和11种其他类成分;基于鉴定出的化合物通过网络药理学得到556个潜在作用靶点;蛋白互作网络(PPI)分析发现MAPK1、Bcl-2等10个核心靶点,富集分析发现核心靶点可能通过MAPK、PI3K-Akt等细胞凋亡相关信号通路发挥抗乳腺癌作用,并通过分子对接技术验证了毛地黄毒苷配基等活性成分与细胞凋亡相关蛋白pERK、Bcl-2、Bax具有良好的结合能力。抗乳腺癌活性研究结果表明与模型对照组比较,EAC低、中、高剂量组肿瘤生长趋势渐缓,肿瘤质量减少,抑瘤率逐渐增加;EAC中、高剂量组脾脏指数有显著性差异,EAC低剂量组脾脏指数效果不显著(
P
<0.05);HE染色观察到给药组肿瘤组织中细胞排列疏松,轮廓不清晰。ELISA法检测小鼠血清,发现EAC高、中剂量组、5-氟尿嘧啶阳性对照组的IL-1β、TNF-α含量均降低。动物验证实验结果表明不同浓度EAC均能下调MAPKs信号通路中p-ERK蛋白的表达(
P
<0.01),而对ERK、JNK、p-38、p-JNK、p-p38蛋白水平无显著性差异;EAC能显著升高小鼠乳腺癌组织中Bax/Bcl-2蛋白水平和基因表达水平。综上,尖尾芋石油醚部位能下调p-ERK蛋白水平,促进癌细胞凋亡从而抑制4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长。
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4.
杜仲叶化学成分、药理活性及现代应用研究进展
李婉玉, 张家旭, 谢兴文, 石晓峰
天然产物研究与开发 2024, 36 (
5
): 900-917. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.5.018
摘要
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272
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杜仲叶是一种传统中药,现收录于《中华人民共和国药典》一部,同时其作为一种药食两用中药,具有较高的研究价值和开发潜力。现代研究表明,杜仲叶主要含有黄酮类、酚酸类、木脂素类、环烯醚萜类等化学成分,具有抗氧化、降血压、降血脂、神经保护和骨保护等药理作用。目前已研制和开发出较多以杜仲叶为主药或原料的药品、保健品和食品,在医疗、化工和养殖业等多个领域均有应用。该文通过检索近20年国内外对杜仲叶的相关研究报道,对其化学成分、药理活性和应用进行整理总结,为后续杜仲叶的研究及资源开发提供科学依据。
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5.
基于网络药理学、分子对接和实验验证探讨莪术-鳖甲药对抗肝纤维化的作用机制
周玉娇, 廖珊珊, 高 攀, 杨钰敏, 李秋杏, 秦旭华, 金沈锐
天然产物研究与开发 2024, 36 (
5
): 856-867. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.5.015
摘要
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266
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采用网络药理学、分子对接技术和实验验证探讨莪术-鳖甲药对(Curcumae Rhizoma-Trionycis Carapax,CRTC)抗肝纤维化的作用机制。首先搜集鳖甲和莪术的化学成分和靶点信息;然后将两味药的作用靶点合并去重。使用疾病数据库以获取肝纤维化的相关基因。提取CRTC和肝纤维化的交集靶点,进一步对“药物-潜在活性成分-潜在靶点”网络进行可视化展示。将交集靶点导入STRING数据库以构建蛋白-蛋白相互作用网络(PPI);然后进行GO功能和KEGG通路富集分析并可视化,再用Autodock Vina软件实现分子对接模型的构建。最后通过体内实验对网络药理学预测的靶点及通路进行实验验证。共筛选得到CRTC与肝纤维化的交集靶点共65个。PPI网络中筛选得到度值排名前四的靶点分别为白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt serine/threonine kinase 1,AKT1)、信号传导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferative activated receptor gamma,PPARG)。GO功能富集分析显示涉及的生物过程有1 025条,细胞组分有41条,分子功能有84条;KEGG通路富集分析得到149条通路,其中关键通路有EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性。分子对接结果显示IL-6、STAT3等核心靶点与其对应成分均有良好的结合活性。体内动物实验结果证实CRTC能改善肝纤维化的病理学形态,且显著抑制了IL-6、EGFR、STAT3的表达。综上所述,CRTC通过多靶点、多通路发挥其抗肝纤维化作用,其机制与网络药理和分子对接技术预测的IL-6/EGFR/STAT信号轴相关。
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6.
九华黄精的化学成分及其抗炎活性研究
张 宇, 夏宬涵, 吴江平, 王国栋, 韩 军
天然产物研究与开发 2024, 36 (
7
): 1149-1157. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.7.006
摘要
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研究“十大皖药”品种——九华黄精(
Polygonatum cyrtonema
Hua in Jiuhua Mountain)块状根茎的化学成分及其抗炎活性。综合采用硅胶柱色谱、MCI柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱等方法从九华黄精生药材的85%乙醇提取物中共分离得到16个化合物,并通过
1
H NMR、
13
C NMR、HR-ESI-MS技术鉴定了化合物结构,分别为polygodoside H(
1
)、polygonatumoside G(
2
)、25(
S
)-funkioside B(
3
)、typaspidoside A(
4
)、芦丁(
5
)、木犀草素-7-
O
-芸香糖苷(6)、山柰酚-7-
O-β-D
-吡喃葡萄糖苷(
7
)、槲皮素-3-
O-β-D
-吡喃葡萄糖苷(
8
)、芹菜素-7-
O-β-D
-葡萄糖苷(
9
)、落叶松脂醇-4-
O-β-D
-葡萄糖苷(
10
)、5-
O
-咖啡酰奎宁酸甲酯(
11
)、4-
O
-咖啡酰奎宁酸甲酯(
12
)、3,5-
O
-二咖啡酰奎宁酸甲酯(
13
)、3,4-
O
-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(
14
)、4,5-
O
-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(
15
)、对羟基肉桂酸甲酯(
16
),所有化合物均是首次从九华黄精中分离得到。活性筛选结果显示化合物
1
~
3
、
5
~
8
均能够有效抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞释放NO,且无细胞毒作用,IC
50
值范围为8.28~41.85 μmol/L,表现出一定程度的抗炎活性。
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7.
不同道地产区黄芩的主要成分和抗氧化活性的比较研究
刘雨然, 郭梦佳, 杨立新, 瞿 燕, 潘晓丽, 杨 滨, 李 化
天然产物研究与开发 2024, 36 (
6
): 919-929. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.6.001
摘要
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262
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探究山东莱芜与河北承德两个道地产区黄芩的黄酮特征指纹图谱及其抗氧化能力的谱-效关系。在构建黄芩超高效液相色谱(ultra-performance liquid chromatography,UPLC)指纹图谱的基础上,采用体外抗氧化法测定25批不同道地产区黄芩对DPPH、ABTS、O
2
-
自由基的清除能力,计算其半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC
50
);运用正交偏最小二乘判别(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)法和双变量相关性分析构建化学成分和抗氧化活性的谱-效关系。25批样品的指纹图谱相似度均大于0.983,确定了16个共有峰,采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用法(ultra-performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS)确认了12个化合物。两个道地产区的黄芩均具有较强的清除DPPH、ABTS和
O
2
-
自由基能力,其中山东莱芜黄芩的抗氧化能力优于河北承德黄芩。OPLS-DA所建的两个模型,均可成功区分两个道地产区的黄芩,且黄芩苷、黄芩素和千层纸素A-7-
O-β-D
-葡萄糖醛酸苷是二者的差异性标志成分。谱效分析发现,黄芩药材中黄酮类成分相互间可能对DPPH、ABTS、
O
2
-
自由基的清除能力具有协同增效作用。本研究建立了基于化学成分和抗氧化活性的黄芩谱效评价模式,可用于不同道地产区黄芩品质的评价,可为中药材的道地性研究提供帮助。
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8.
基于网络药理学、分子对接技术及实验验证研究黄芪提取物治疗缺血缺氧性脑病的机制
宋丽娅, 李丽华, 毕思童
天然产物研究与开发 2024, 36 (
3
): 520-527. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.3.015
摘要
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运用网络药理学、分子对接技术探究黄芪提取物治疗缺血缺氧性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)的机制,并进行实验验证。通过中药系统药理学数据库平台(TCMSP)、UniProt、GeneCards和OMIN数据库获得黄芪提取物的主要活性成分和基因靶点,通过GeneCards数据库获得HIE的相关靶点;利用Cytoscape软件构建黄芪提取物“活性成分-药物靶点”网络。应用PDB和TCMSP数据库获取分子结构,使用SYBYL-X2.1软件进行模拟分子对接。建立大鼠动物试验模型,采用Western blot法检测关键蛋白的表达情况。根据TCMSP数据库,共得到黄芪提取物的70个活性成分及其350个相关靶点,去除重复靶点和基因注释后,最终获得“黄芪提取物”有效成分的120个靶点。通过将黄芪提取物的120个靶点与HIE的前242个靶点(相关性分数>5)相映射,筛选出黄芪提取物治疗HIE的18个潜在靶点,发现4-羟基肉桂酸、顺式阿维酸、黄芪紫檀烷苷、常春藤皂苷元、华良姜素为关键活性成分。将18个潜在靶点输入STRING中进行蛋白相互作用分析,共发现3个核心靶点(degree值>30),分别为诱导型一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)、前列腺素氧化环化酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)。动物实验显示,黄芪提取物能够降低大鼠模型海马组织内的NOS2、PTGS2、MAPK4、CASP8蛋白表达。通过网络药理学分析和实验验证得出黄芪提取物能够通过多靶点、多通路起到抑制神经元凋亡、保护神经细胞的作用。
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9.
金线莲苷的研究现状
张闻婷, 杨旻静, 梅 瑜, 王继华
天然产物研究与开发 2024, 36 (
2
): 348-356. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.2.017
摘要
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金线莲苷(kinsenoside),一种从药用植物金线莲中提取的天然生物活性糖苷,已被证明具有显著的药理功效。本文通过收集金线莲苷的相关研究文章,尤其针对近几年更新发表的研究成果,整理分析后将金线莲苷的研究现状主要分为3方面,即:金线莲苷的基本信息,包括化学结构、来源物种及影响积累的因素;金线莲苷的分离提取、定性定量检测、人工合成方法总结;金线莲苷的药理作用,包括降血糖、降血脂、保肝作用及缓解骨病变等。鉴于金线莲苷的原材料资源匮乏,人工种植成本昂贵导致的市场应用受限,我们认为通过提高开唇兰属植物中金线莲苷的提取效率,开发更多含有金线莲苷的植物,或以栽培效率和人工合成技术的进步等方式解决生产实践问题。而在药理研究方面,我们支持通过在大型灵长类动物上进行剂量毒性试验,开发靶向治疗策略提高治疗准确性,以及精确金线莲苷使用的干预时间点等试验为金线莲苷在未来临床实践中的转化应用奠定基础。
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10.
岳西小黄姜精油提取优化及成分分析
马卓云, 王洪新
天然产物研究与开发 2024, 36 (
4
): 562-571. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.4.002
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255
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为了确定岳西小黄姜精油最佳提取工艺,探究不同提取方法对小黄姜精油得率和微观结构的影响,建立岳西小黄姜挥发性物质GC-MS检测方法。该研究分别采用水蒸气蒸馏法、超声辅助水蒸气蒸馏法、超声-微波协同辅助水蒸气蒸馏法、超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法提取小黄姜精油。比较各方法的精油得率,选择得率最高的方法进行单因素试验和正交优化确定最佳提取工艺。结果表明,超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法的精油得率最高,最佳提取工艺为:料液比1∶3.5(g/mL)、超声温度50 ℃、超声功率400 W、超声时间20 min、复合酶用量(半纤维素酶∶
β
-葡萄糖苷酶=1∶1)40 U/g、酶解温度40 ℃、酶解pH值5.5、酶解时间2 h、提取时间45 min。在此条件下精油得率为3.28%。对精油提取后的姜渣进行扫描电镜观察,经超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法得到的姜渣细胞完整性破坏最为严重,说明该方法对精油的提取更为彻底。采用顶空固相微萃取(headspace solid-phase microextraction,HS-SPME)提取法和超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法从鲜姜中共提取鉴定出75种挥发性物质,其中HS-SPME提取法鉴定出49种,超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法提取鉴定出60种。本研究为小黄姜精油提取提供了新思路,并为生姜深加工利用提供了参考依据。
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11.
淫羊藿苷对抑郁症模型小胶质细胞表型转化的调控作用
曹利华, 高 松, 王笑雨, 王真真, 贺红娟, 李 娜, 白 明, 苗明三
天然产物研究与开发 2024, 36 (
2
): 187-195. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.2.001
摘要
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251
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探索淫羊藿苷抗抑郁的作用机制,将SPF级KM小鼠分为空白组、模型组、盐酸氟西汀组(10 mg/kg)、淫羊藿苷高(50 mg/kg)、低(25 mg/kg)剂量组。除空白组外,其余各组小鼠采用56 d慢性不可预知温和应激建立抑郁症模型。造模第1 d开始灌胃给予各组小鼠相应药物,连续56 d。于给药后第53~56 d,进行行为学测试。末次给药后,取材。酶联免疫吸附剂实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测脑组织匀浆白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)检测脑组织中IL-6、IL-10、诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、分化簇206(cluster of differentiation 206,CD206)mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)检测脑组织iNOS、CD206蛋白表达。体外培养小鼠小胶质细胞(BV-2),采用细胞增殖与毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法检测淫羊藿苷的细胞毒性。BV-2细胞暴露于100 μg/mL脂多糖及15 μg/mL、25 μg/mL的淫羊藿苷24 h后,收集细胞。免疫荧光技术检测细胞iNOS、CD206蛋白表达。研究结果表明,慢性不可预知温和应激致抑郁症模型制备成功,淫羊藿苷可降低抑郁症小鼠脑组织IL-6水平及IL-6、iNOS mRNA表达,升高脑组织IL-10、5-HT、DA、NE水平及IL-10、CD206 mRNA表达;降低脑组织iNOS蛋白,升高CD206蛋白表达;改善模型小鼠抑郁症样行为。淫羊藿苷可降低LPS刺激的BV-2细胞iNOS蛋白表达,升高CD206蛋白表达。结果表明,淫羊藿苷抑制小胶质细胞M1表型转化,促进M2表型转化,从而改善模型小鼠抑郁样行为。
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12.
基于谱效关系和成分敲除探讨独一味总黄酮抗类风湿关节炎的关键成分
陈瑞鑫, 康点点, 詹琥珀, 蒋桂华, 蒋运斌
天然产物研究与开发 2023, 35 (
11
): 1833-1841. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2023.11.001
摘要
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为探讨独一味总黄酮抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的关键成分,阐明独一味治疗RA的药效物质基础,本研究建立了独一味总黄酮的指纹图谱,13批独一味总黄酮指纹图谱共标示了8个共有峰,指认了其中3个共有峰。同时基于13批独一味总黄酮样品对成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)活力的影响,建立了独一味总黄酮抗RA的谱效关系,结果表明木犀草苷和木犀草素为独一味总黄酮抗RA的关键成分。采用成分敲除技术探讨独一味总黄酮中木犀草苷成分抗RA的药效,并比较了等摩尔量木犀草苷和木犀草素对照品分别对FLS细胞活力的影响,结果表明木犀草苷和木犀草素成分均能显著抑制FLS细胞活力(
P
<0.01),且二者抑制率无显著性差异。结合独一味总黄酮HPLC图谱中木犀草苷含量明显高于木犀草素,表明木犀草苷为独一味总黄酮抗RA的关键成分之一,可为临床运用独一味治疗RA提供一定的参考。
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13.
补阳还五汤加减通过Nrf2/ARE信号通路防治动脉粥样硬化的机制研究
范增光, 袁 野, 欧阳效强, 赵永法
天然产物研究与开发 2024, 36 (
4
): 644-652. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.4.011
摘要
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236
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基于益心祛瘀化痰法,探讨补阳还五汤加减调控核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)/抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)信号通路防治动脉粥样硬化的机制。本研究选取ApoE
-/-
小鼠进行模型复制,模型复制成功后分为模型组、补阳还五汤加减低、中、高剂量组、阿托伐他汀组、C57BL/6J背景的ApoE
-/-
小鼠空白组。第9周开始灌胃,连续灌胃4周。HE及油红O染色观察小鼠主动脉窦病理学变化;免疫组化法检测高级氧化蛋白产物(advanced oxidative protein product,AOPP)、细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)表达水平;生化分析仪测定血脂表达水平;ELISA法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)表达水平;Western blot法检测沉默信息调节因子1(sirtuin1,SIRT1)、Nrf2、血红素氧化酶1(heme oxygenase-1,HO-1)及醌氧化还原酶l(NAD(P)H:quinone oxidoreductase,NQO-1)蛋白表达;RT-PCR法检测HO-1、NQO1基因的mRNA表达。结果显示,与模型组比较,补阳还五汤加减能够改善AS模型小鼠主动脉窦病理学改变(
P
<0.01);降低主动脉斑块中AOPP、ROS表达水平(
P
<0.01);升高小鼠血浆中高密度脂蛋白胆固醇表达水平(
P
<0.01),降低总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇表达水平(
P
<0.01);升高SOD、GSH-Px表达水平(
P
<0.01),降低MDA表达水平(
P
<0.01);上调小鼠主动脉中SIRT1、Nrf2、HO-1及NQO1蛋白表达水平(
P
<0.01);并可以上调小鼠主动脉中HO-1、NQO1基因的mRNA表达(
P
<0.01)。提示补阳还五汤加减通过调控氧化应激损伤发挥抗AS的作用,可能与Nrf2/ARE信号通路活化有关。
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14.
藏红花素调控NLRP3通路抑制上皮间质转化治疗糖尿病肾病的机制研究
刘玉斌, 苏金浩, 陈 伟, 王 军, 及晓晖, 刘英凯, 王元松
天然产物研究与开发 2024, 36 (
4
): 589-596. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.4.005
摘要
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233
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本研究从上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和NLRP3通路角度研究藏红花素(crocin,CRO)治疗糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的效果及作用机制。将60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周,随机选取10只作为正常组,采取正常饲养。其余小鼠接受高脂饮食继续喂养8周,之后链脲佐菌素造模并随机平均分为模型组、MCC950组(10 mg/kg MCC950,腹腔注射)、低剂量CRO组(5 mg/kg,灌胃)、中剂量CRO组(10 mg/kg,灌胃)、高剂量CRO组(20 mg/kg,灌胃)。治疗8周后,收集小鼠24 h尿液样本、血液样本、肾脏进行分析测定。采用试剂盒测定小鼠24 h尿蛋白定量(24 h-urine total protein,24 h-UTP)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)评估其肾功能。对肾脏同一部位进行苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)、马松(Masson)染色,观察其病理学变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerasechain reaction,RT-qPCR)以及蛋白质印迹(Western blotting)检测EMT相关因子[上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、波形蛋白(vimentin,VIM)、平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子-β(transforming growth factor beta,TGF-β)]表达情况以评估CRO对EMT的影响,检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)相关因子[NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、半胱氨酸天冬氨酸酶1剪切体(cleaved-caspase-1)、白介素1β成熟体(mature-interleukin-1 beta,mature-IL-1β)、白介素18成熟体(mature-IL-18)]表达情况以评估CRO对NLRP3通路的影响。结果表明,与模型组相比,CRO治疗后,DKD小鼠Scr、BUN、24 h-UTP有不同程度降低,肾组织病理损伤有不同程度的好转,E-cad表达升高,VIM、α-SMA、TGF-β1表达降低,NLRP3、ASC、cleaved-caspase-1、mature-IL-1β、mature-IL-18表达下调。以上结果提示CRO可以通过抑制NLRP3通路抑制上皮细胞-间充质细胞转换EMT最终缓解DKD。
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15.
HS-SPME-GC-TOF-MS结合ROAV分析花果香型红茶特征香气成分
王金源, 张佳慧, 庄莉萍, 林宏政, 封娇, 田维素, 陈章盛, 郝志龙
天然产物研究与开发 2023, 35 (
12
): 2015-2026. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2023.12.001
摘要
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229
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为探究永泰菜茶与金牡丹加工的花果香型红茶特征香气成分,采用顶空固相微萃取-气相色谱-飞行时间质谱联用(HS-SPME-GC-TOF-MS)技术,结合正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)与相对气味活度值(ROAV)分析金牡丹红茶和6个永泰(Y-122、Y-127、Y-128、Y-170、Y-192、Y-193)加工的花果香红茶香气成分。7个红茶样中共鉴定出82种挥发性物质,包括醇类、酯类、醛类、酮类、酸类、烯类等,其中醇类、酮类、酯类物质相对含量较高,依据变量重要性投影(VIP)筛选出21种特征挥发性物质(VIP>1,
P
<0.05),进一步结合相对气味活度值(ROAV)筛选出13种特征香气物质(VIP>1,ROAV>1.00),其中橙花叔醇、苯乙醇和己酸叶醇酯是构成金牡丹红茶果香带花香的特征香气物质,水杨酸甲酯是Y-122呈现杏仁香的特征香气物质,芳樟醇是Y-127呈现馥郁花香带果香的特征香气物质,
γ
-壬内酯和
α
-法呢烯为Y-192呈现清花香带果香的特征香气物质。可见,7个花果香型红茶香气特征物质存在差异,具有花果香特征的芳樟醇、水杨酸甲酯、
γ
-壬内酯和
α
-法呢烯是永泰菜茶红茶的关键呈香物质,为特殊香型红茶种质资源挖掘与品质调控提供参考。
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16.
连翘叶总黄酮对斑马鱼溃疡性结肠炎的作用研究
吕允珂, 郑 萱, 张 菊, 崔施展, 王明雪, 周春伶, 贾东升
天然产物研究与开发 2024, 36 (
8
): 1279-1287. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.8.001
摘要
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226
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研究连翘叶总黄酮(
Forsythia suspensa
leaf total flavonoid,FSLF)对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonicacid,TNBS)诱导斑马鱼溃疡性结肠炎的疗效作用。采用D101大孔树脂对FSLF分离纯化并使用超高效液相色谱-质谱联用仪(UPLC-MS)分析成分;将36条野生斑马鱼分为空白组、模型组、FSLF低、中、高剂量给药组(10、20、40 μg/mL)、地塞米松组(50 μg/mL),除空白组外,其余各组均用160 mmol/L TNBS肛门注射诱导斑马鱼溃疡性结肠炎模型,使用苏木素-伊红、阿利新蓝染色法观察斑马鱼结肠组织病理和杯状细胞数量变化,通过试剂盒检测斑马鱼结肠组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量和活性变化,经荧光定量PCR法检测斑马鱼结肠组织中髓样分化因子88(mycloid differentiation factor 88,MyD88)、肿瘤坏死因子相关分子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)、核因子-
κ
B(nuclear factor-
κ
B,NF-
κ
B)p65、肿瘤坏死因子-
α
(tumor necrosis factor-
α
,TNF-
α
)、白细胞介素-1
β
(interleukin-1
β
,IL-1
β
)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)mRNA表达量。结果显示,FSLF 30%乙醇洗脱部位总黄酮含量最高,UPLC-MS共鉴定出芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷、金丝桃苷、山柰酚-3-
O
-芸香糖苷、槲皮素、橙皮苷、山柰酚、紫云英苷9种黄酮类化学成分。与模型组相比FSLF可改善斑马鱼结肠组织结构,提高杯状细胞数量(
P
<0.001),降低ROS含量(
P
<0.05)和MyD88/TRAF6/NF-
κ
Bp65、TNF-
α
、IL-1
β
mRNA表达量,升高SOD活性(
P
<0.01)和IL-10 mRNA表达量(
P
<0.05)。本研究表明FSLF对斑马鱼溃疡性结肠炎有明显治疗作用,其作用机制可能与通过调节信号通路NF-
κ
B,下调炎性因子TNF-
α
、IL-1
β
和上调IL-10 mRNA表达量有关。
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17.
乌药中3个新的倍半萜
李业生, 白旭岚, 许红涛, 侴桂新
天然产物研究与开发 2024, 36 (
4
): 555-561. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.4.001
摘要
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212
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研究乌药的化学成分。采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、制备液相等多种色谱分离技术进行分离纯化,通过波谱数据分析进行结构鉴定。从乌药90%乙醇提取物中分离得到4个倍半萜,分别鉴定为linderaggredin B1(
1
)、乌药酮酸A(
2
)、乌药酮酸B(
3
)、chlorahupetolide K(
4
),其中化合物
1
~
3
为新化合物,化合物
4
为首次从樟科中分离得到。
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18.
盐肤木叶中化学成分及抗氧化活性研究
陈 鑫, 李蓉涛, 曾建国
天然产物研究与开发 2024, 36 (
5
): 755-761. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.5.003
摘要
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206
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研究盐肤木
Rhus chinensis
Mill.叶的化学成分。利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱等技术,从盐肤木叶95%乙醇提取物中分离纯化得到了15个化合物。根据化合物的理化性质和波谱数据确定了它们的结构,分别为3-hydroxy-5-methylphenol 1-
O-β-D
-(6′-benzoyl)glucopyranoside(
1
)、对羟基苯乙醇(
2
)、松脂素(
3
)、(3
S
,5
R
,6
S
,7
E
)-3,5,6-trihydroxy-7-megastigmen-9-one(
4
)、丁香脂素(
5
)、2,4,6-三羟基苯乙酮(
6
)、野漆树双黄酮(
7
)、去氢吐叶醇(
8
)、槲皮素(
9
)、没食子酸乙酯(
10
)、7
S
,8
R
-二氢去氢双松柏醇(
11
)、贝壳杉黄酮(
12
)、4,6-二羟基-2-
O
-(
β-D
-吡喃葡萄糖苷)苯乙酮(
13
)、3-hydroxy-5-methylphenol 1-
O-β-D
-(6′-galloyl)glucopyranoside(
14
)、debiloside A(
15
)。其中化合物1为新化合物,化合物
2
、
4
、
6
、
7
、
8
、
13
、
15
为首次从盐肤木属中分离得到。DPPH、ABTS自由基清除实验结果显示,化合物
9
、
10
、
11
、
14
对DPPH、ABTS自由基均表现出良好的清除活性,其中化合物
9
和
10
活性最为显著,强于阳性对照V
C
。
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19.
常山胡柚果皮精油提取工艺模型筛选优化、化学成分及抗氧化活性研究
江丽洁, 温乐乐, 石佳艺, 邓雅慧, 刘巨钊, 袁 强, 崔 琦
天然产物研究与开发 2024, 36 (
7
): 1101-1111. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.7.001
摘要
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202
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研究常山胡柚果皮(C
itrus × aurantium
Changshan-huyou pericarp,CP)精油化学成分,并对提取条件进行优化。采用水蒸气蒸馏法提取CP精油,利用气相色谱-质谱法进行分析,通过单因素试验考察不同提取条件对提取率的影响,并利用响应面、人工神经网络进行工艺优化。结果表明,CP精油中主要成分为
D
-柠檬烯;最佳工艺条件:粒径24目、蒸馏水浸泡1 h、液固比34.86 mL/g、提取温度300.00 ℃、提取时间166.21 min,在此条件下,CP精油提取率为0.82%,响应面与人工神经网络相结合,可有效地利用已有数据对目标寻优。同时CP精油对DPPH自由基有明显的清除作用(IC
50
值为65.01 mg/mL),表明CP精油具有一定的抗氧化活性。
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20.
枸杞子结合多酚碱水解与酸水解提取工艺的比较和产物分析
王 妍, 曾文俊, 张玉婷, 布尔汉·洁吾海尔阿依, 李艳萍, 丁建宝, 李娆娆, 杨 晋
天然产物研究与开发 2024, 36 (
4
): 632-643. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.4.010
摘要
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191
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为了全面评估枸杞子中的酚类成分,本研究分别利用碱水解和酸水解法制备了其中的结合多酚(non-extractable phenolic compounds,NEPC)。选取Box-Behnken实验设计建立了酸或碱的浓度、水解时间和料液比等与NEPC得率之间的数学模型,并优化了水解工艺参数。碱水解过程中的时间对NEPC得率影响显著,而料液比对酸水解的结果影响较大;最佳工艺条件下,碱水解和酸水解获得的NEPC分别为0.65±0.05 mg/100 g和0.52±0.03 mg/100 g。利用UPLC-Q-TOF-MS,从水解产物中解析了11种化合物,主要是苯丙素衍生物。11种化合物都可在酸水解产物中被检出,而碱水解产物中仅鉴定出4种物质。研究结果表明,碱水解能得到更多的NEPC,酸水解产物则表现出良好的化合物多样性,因此制备NEPC时,应根据不同的研究目的选择水解方法。
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21.
鱼腥草乙酸乙酯萃取部位的化学成分及抗植物病原菌活性研究
张 丽, 孙建鹏, 巴其斌
天然产物研究与开发 2024, 36 (
4
): 616-621. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.4.008
摘要
(
189
)
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(630KB)(
21
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采用硅胶、大孔树脂、葡聚糖凝胶、MCI树脂、薄层色谱以及高效液相色谱等色谱分离方法,从鱼腥草(
Houttuynia cordata
)地上部分95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到10个化合物。运用质谱、核磁共振等波谱技术和文献对比法鉴定了其结构,分别鉴定为去氢催吐萝芙木醇(
1
)、5,6-环氧-3-羟基-
β
-紫罗兰酮(
2
)、黑麦草内酯(
3
)、pubinernoid A(
4
)、槲皮苷(
5
)、槲皮素(
6
)、阿福豆苷(
7
)、4-甲氧基苯-1,2-二醇(
8
)、4-羟基苯甲醛(
9
)、苯甲酸(
10
)。化合物
1~4
为首次从鱼腥草中分离得到的降碳倍半萜。对所有化合物进行了抗植物病原菌活性筛选,结果显示:在40 mg/mL浓度下,化合物
5~7
对禾谷镰刀菌、褐枝孢菌、番茄灰霉病菌、瓜类球腔菌和棉花枯萎病菌抑菌率介于38%~50%之间。
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22.
茶成分对肠道菌群的调控作用及其健康效应的研究进展
储思远, 钱利生, 陈海敏
天然产物研究与开发 2024, 36 (
2
): 357-367. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.2.018
摘要
(
186
)
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(1237KB)(
30
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茶是世界上最受欢迎的健康饮料之一,富含茶多酚、茶多糖、茶色素和茶皂素等多种生物活性成分,对人体健康具有重要影响。肠道是一个复杂而稳定的生态系统,肠道微生态与人体健康密切相关。肠道菌群是茶成分发挥生理调节作用和健康效应的主要作用靶点,本文对近年来几种重要茶成分对肠道菌群的调节作用及其对机体健康的影响相关研究进展进行了综述。茶成分主要通过靶向肠道菌群调节糖代谢和脂代谢,减轻炎症和肠道损伤,缓解情绪和记忆障碍以及调节昼夜节律,发挥其健康效应。阐明茶成分调控肠道菌群的内在作用机制将为更好地利用茶产品来改善肠道微生态,促进人体健康提供科学依据。
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23.
黄姜花花的化学成分、抗氧化、酶抑制活性及抗炎作用研究
丁芙蓉, 贾小演, 吴相欢, 吴 霞, 杨 念, 刘雄利, 田民义
天然产物研究与开发 2024, 36 (
1
): 13-25. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.1.002
摘要
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184
)
PDF(pc)
(1727KB)(
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研究黄姜花花提取物的化学成分、抗氧化、酶抑制活性及抗炎作用。本文采用回流提取法制得黄姜花花水提物和醇提物,使用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-Q-Orbitrap MS)分析其提取物化学成分,共鉴定出58种化合物,包括11种酚类和18种黄酮类化合物。黄姜花花提取物具有较好的抗氧化活性,对DPPH、ABTS自由基的清除作用较强,同时能够抑制
α
-葡萄糖苷酶、酪氨酸酶、乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的活性。提取物在无毒范围内(62.5、125、250 μg/mL)能显著降低LPS诱导的RAW 264.7细胞中促炎症介质(NO和PGE2)和细胞因子(TNF-
α
、IL-6和IL-1
β
)的过度分泌。本实验为黄姜花花在食品、药品、化妆品等行业的开发利用提供理论基础。
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24.
中麻黄的化学成分研究
范锡玲, 曹彦刚, 焦新棉, 郑晓珂, 冯卫生
天然产物研究与开发 2024, 36 (
3
): 415-422. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.3.005
摘要
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183
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研究中麻黄(
Ephedra intermedia
Schrenk et C.A.Mey.)干燥草质茎的化学成分及其抗哮喘活性。应用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、Toyopreal HW-40C柱色谱以及半制备型高效液相色谱等多种手段对中麻黄草质茎的50%丙酮提取物进行化学成分研究,从中分离鉴定了22个化合物,根据其理化性质和波谱学数据鉴定其结构,分别为4-甲氧基肉桂酸(
1
)、肉桂酸(
2
)、
ω
-hydroxypropioguaiacone(
3
)、threo-8
S
-7-methoxysyringylglycerol(
4
)、3-(2,4′-dihydroxy-3′,5′-dimethoxyphenyl)propanoic acid(
5
)、8-hydroxy-9-methyl-7-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-7-propanone(
6
)、3-羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮(
7
)、2-羟基-1-(4-羟基-3-甲氧基)苯基-1-丙酮(
8
)、异咖啡酸甲酯(
9
)、
trans
-syringin(
10
)、
cis
-syringin(
11
)、(4
R
)-4-hydroxy-4-(2-hydroxypropan-2-yl)cyclo-hex-1-ene-1-carboxylic acid(
12
)、7-羟基-
α
-松油醇(
13
)、去氢吐叶醇(
14
)、脱落酸(
15
)、黑麦草素内脂(
16
)、(
E
)-3-(3-hydroxybut-1-enyl)-2,4,4-trimethylcyclohexa-2,5-dienone(
17
)、3-(3′-hydroxybutyl)-2,4,4-trimethylcyclohexa-2,5-dienone(
18
)、对异丙基苯甲酸(
19
)、
p
-cymen-7-yl
β-D
-glucopyranoside(
20
)、acyclic 7-hydroxygeranic acid(
21
)、7,7-dimethylbicyclo[3.1.1]hept-2-ene-1-carboxylic acid(
22
),其中化合物
3
~
6
、
8
、
10
~
14
、
17
~
19
、
21
、
22
为首次从该植物中分离得到,同时经体外抗哮喘活性筛选,结果显示化合物
11
和
14
能够显著抑制
β
-氨基己糖苷酶的释放。
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25.
二氢杨梅素结构修饰及生物活性研究进展
吴 聪, 王文茂, 彭彩云, 盛文兵
天然产物研究与开发 2024, 36 (
3
): 540-553. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.3.017
摘要
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181
)
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二氢杨梅素是一种二氢黄酮醇,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤以及保肝护肝等多种生物活性。由于其结构中的6个羟基导致其脂溶性差及生物利用度低,因此对其进行结构修饰以期提高生物利用度和生物活性。本文综述了二氢杨梅素的化学法结构修饰及其生物活性等研究工作,化学修饰方法涉及醚化反应、酯化反应和金属配合物等方法,合成的衍生物具有抗病毒、抗菌、抗氧化、神经保护以及抑制肿瘤细胞增殖等活性,并且提出二氢杨梅素结构修饰过程中存在的挑战及发展方向,为更好地开发二氢杨梅素衍生物提供技术服务。
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26.
基于整合药理学和实验验证探讨健脾除痰解毒方干预肺癌的作用机制
詹 雪, 冯诗函, 杨 倩, 谭 琪, 夏琳涛, 张佳艳, 范宇翔, 王淑美
天然产物研究与开发 2024, 36 (
5
): 868-880. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.5.016
摘要
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176
)
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基于整合药理学和实验验证探讨健脾除痰解毒方(Jianpi Chutan Jiedu Decoction,JCJD)干预肺癌的作用机制。采用中医药整合药理学研究平台(Integrative Pharmacology-based Research Platform of Traditional Chinese Medicine,TCMIP)V2.0,检索并获取健脾除痰解毒方靶标及功能信息,以及肺癌疾病靶标及功能信息,借助中医关联网络挖掘平台构建“疾病-方剂”关联网络,并通过网络拓扑特征计算、自定义多维关联网络可视化(方剂-中药材-核心靶标-通路-疾病)以及基因本体(GO)功能和依托Reactome数据库的Pathway信息进行富集分析,发现健脾除痰解毒方干预肺癌的关键网络靶标及其作用机制。最后通过动物实验进一步验证整合药理学结果。结果共获得健脾除痰解毒方干预肺癌的核心靶标53个;GO富集分析得到生物过程有20种条目,细胞组分有11种条目,分子功能有20种条目;Reactome Pathway富集分析得到11个条目,主要涉及呼吸电子传递、TP53调节代谢基因、细胞内受体的SUMO化、白细胞介素(IL)-4和IL-13通路等信号通路。动物实验结果显示与模型组比较,联合组肿瘤组织中乳酸含量明显下降(
P
<0.05),联合组可明显上调肿瘤组织中磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)蛋白平均光密度值(
P
<0.05),降低丙酮酸激酶M2(PKM2)和己糖激酶2(HK2)蛋白平均光密度值(
P
<0.05);与模型组比较,联合组可明显上调肿瘤组织中肿瘤抑制蛋白(P53)、PTEN mRNA及蛋白表达(
P
<0.01,
P
<0.05),降低肿瘤组织中TP53诱导的糖酵解与凋亡调控因子(TIGAR)、葡萄糖转运蛋白1 (GLUT1)、PKM2、HK2 mRNA及蛋白表达(
P
<0.01)。综上,健脾除痰解毒方通过TP53调节代谢基因来下调葡萄糖代谢,从而抑制肺癌增殖。
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27.
南五味子药材UPLC指纹图谱及一测多评法研究
刘晓霞, 位翠杰, 冯涌微, 张芳平, 段志文, 谢文凯, 何民友, 李振雨
天然产物研究与开发 2024, 36 (
1
): 1-12. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.1.001
摘要
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175
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建立南五味子药材超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱和6种木脂素类成分一测多评法(QAMS),为南五味子药材质量标准提高提供参考。采用UPLC法建立南五味子药材指纹图谱,运用聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对指纹图谱进行分析;以五味子酯甲为内参物,建立五味子酯丙、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素和五味子酯丁的一测多评法,并与外标法(ESM)测定结果对比,判断方法的准确性。14批南五味子药材指纹图谱确定了15个共有峰,通过对照品比对指认了其中7个成分,分别为原儿茶酸、五味子酯丙、五味子酯甲、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素、五味子酯丁,其指纹图谱相似度均在0.95以上;通过聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘法-判别式分析(OPLS-DA)可以将南五味子药材分为4类,峰1(原儿茶酸)、峰2、峰4、峰6、峰7(五味子酯乙)、峰8、峰9、峰12、峰15共9个成分是导致产地差异性的主要标志物。一测多评法与外标法测定的五味子酯丙、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素和五味子酯丁含量结果无显著差异。所建立的方法简便、可靠,为南五味子药材质量评价提供参考。
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28.
基于网络药理学和动物模型验证探讨绞股蓝治疗慢性疲劳综合征的作用机制
李红玉, 赵冰洁, 李悦宁, 肖柯心, 詹 博, 王 番, 郭东艳, 贾艳艳
天然产物研究与开发 2023, 35 (
12
): 2168-2182. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2023.12.016
摘要
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本研究运用网络药理学和动物模型验证方法探究绞股蓝治疗慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)的有效活性成分及作用机制。通过TCMSP、TCMID、BATMAN-TCM和SWISS-TARGET数据库中发掘绞股蓝的有效成分及作用靶点;通过OMIM、GeneCards数据库获取CFS靶点;将药物靶点与疾病靶点映射后筛选出交集靶点并绘制活性成分-共有靶点网络;通过String数据库及Cytoscape3.7.1构建PPI网络;通过R语言对核心靶点进行GO和KEGG富集分析;通过Autodock Vina对核心成分与核心靶点进行分子对接;建立慢性疲劳综合征小鼠模型,并使用绞股蓝对慢性疲劳综合征的治疗作用进行动物试验验证。结果得到绞股蓝有效成分17个,对应靶点583个,慢性疲劳综合征的靶点数为2 692个,共有靶点筛选结果有266个,核心靶点数为96个。KEGG富集通路主要包括P13K-AKT、脂质和动脉硬化、流体剪切应力和动脉粥样硬化等信号通路。分子对接结果显示绞股蓝核心成分与CFS核心靶点结合力良好。动物实验显示,绞股蓝可延长模型组小鼠运动时间,显著降低小鼠血清尿素氮水平及乳酸脱氢酶活性。Western blot实验显示绞股蓝提取物可显著上调慢性疲劳小鼠肌肉组织PI3K、AKT蛋白的表达,显著下调P-PI3K、P-AKT、STAT3蛋白的表达。综上所述,本研究初步提示绞股蓝可能通过调控STAT3、TP53、SRC、AKT1、HSP90AA1等核心靶点及PI3K/AKT信号通路发挥治疗慢性疲劳综合征的作用。
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29.
冬虫夏草多糖的结构表征及改善胞葬功能障碍的作用与机制研究
杨兴茂, 杨采霞, 周小仝, 廖郑悦, 刘思静, 国锦琳
天然产物研究与开发 2024, 36 (
8
): 1288-1297. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.8.002
摘要
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基于过氧化物酶体增殖物激活受体
γ
(peroxisome proliferator-activated receptor
γ
,PPAR-
γ
)探究冬虫夏草多糖(Cordyceps polysaccharides,CSP)对改善巨噬细胞胞葬功能的作用及机制。采用水提醇沉法提取CSP;利用高效液相凝胶色谱法、PMP柱前衍生高效液相色谱法、甲基化法分析CSP的分子量分布、单糖组成及糖苷键连接类型。通过CCK-8法、实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和流式细胞术分别测定CSP对巨噬细胞细胞活力、胞葬相关基因及胞葬功能的影响;采用间接免疫荧光法观察CSP对PPAR-
γ
的表达量和核定位的影响;利用小干扰RNA转染技术验证PPAR-
γ
在CSP改善胞葬功能中的作用。结果显示,CSP的总糖含量为72.9%,分子量分布为21.9、2 100 kDa及大于50 000 kDa;主要由葡萄糖、半乳糖和甘露糖三种单糖组成,含6种主要糖苷键。与模型组相比,CSP处理提高了胞葬相关基因TAM酪氨酸激酶受体(Tyro3/Axl/Mer receptor tyrosine kinase,TAM)和乳脂球表皮生长因子8(Milk fat globule-epidermal growth factor 8,Mfge8)的表达(
P
<0.05)以及巨噬细胞对凋亡细胞的胞葬能力(
P
<0.05)。免疫荧光结果表明CSP促进了PPAR-
γ
的蛋白表达(
P
<0.001)与核转位。敲低PPAR-
γ
后,逆转了CSP对巨噬细胞胞葬相关基因表达的促进作用。本研究表明CSP可能通过激活PPAR-
γ
信号通路增强氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的小鼠巨噬细胞胞葬作用。
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30.
火麻叶中大麻二酚提取工艺的响应面法优化及不同部位含量分布
张一宁, 于志琪, 屈施旭, 刘同歌, 张玉红
天然产物研究与开发 2024, 36 (
3
): 369-376. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.3.001
摘要
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本文研究一种超声波辅助提取火麻叶中大麻二酚(cannabidiol,CBD)的方法,同时分析火麻不同部位的CBD含量。首先建立CBD的HPLC检测方法,采用单因素实验确定超声提取功率、提取温度、提取时间、料液比4个因素对火麻叶中CBD提取率的影响;利用Design-expert软件进行Box-Benhnken实验设计确定并验证CBD的超声辅助提取的最优工艺条件,并检测火麻不同部位CBD含量。实验表明:采用Agilent HC-C
18
柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),检测波长:220 nm,流速:1.0 mL/min,柱温:28 ℃,流动相:甲醇-水=90∶10,等度洗脱,在此条件下的分离效果和峰型较好,并且结果准确可靠,稳定性好。以甲醇为提取溶剂,最佳提取工艺条件为:提取功率320 W,提取温度81 ℃,提取时间26 min,料液比1∶22 g/mL,在此条件下得到CBD含量的平均值为79.53±0.26 mg/g。火麻嫩叶中CBD含量最高,其余依次为老叶、种子和茎,根中含量最低。结果表明,超声波提取是一种高效的大麻二酚提取方法,且作为一种天然产物资源,大麻二酚具有重要的开发利用价值。
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31.
基于网络药理学及体外实验探究野蚕豆根抗氧化活性及其作用机制
刘鑫澜, 朱朋艳, 马金蓉, 王星月, 韦 茜, 高艳梅, 张冬英, 袁文娟
天然产物研究与开发 2024, 36 (
1
): 155-166. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.1.017
摘要
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169
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利用网络药理学和体外实验探讨野蚕豆根抗氧化活性物质基础及作用机制。首先,采用DPPH法、ABTS法、清除羟自由基法对野蚕豆根进行体外抗氧化实验验证;通过TCMSP数据库和文献搜索筛选出野蚕豆根中的活性物质,同时收集其作用靶点;借助OMIM、GeneCards数据库获得氧化应激相关疾病靶点;将野蚕豆根成分靶点与氧化应激靶点取交集,通过STRING数据库构建蛋白互作网络(protein-protein interaction networks,PPI);利用R语言对交集靶点进行基因本体(GO,Gene Ontology)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析;借助AutoDock 1.5.7软件对核心成分及关键靶点基因进行分子对接,通过Pymol进行可视化操作;利用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测进行机制验证。结果显示,野蚕豆根提取物对DPPH自由基、ABTS自由基和羟基自由基有一定的清除能力,其半数抑制浓度(IC
50
)分别为0.166、0.054和0.180 mg/mL;从野蚕豆根中共筛选出22个活性成分,86个成分靶点以及84个交集靶点,其中包括STAT3、HSP90AA1、HDAC1等23个核心靶点;GO富集分析共得到了3 386个条目,主要包括碳水化合物结合、核受体活性等分子功能。KEGG富集分析共得到了211个条目,主要包括PI3K-Akt信号通路、化学致癌-受体激活等通路;分子对接结果显示,野蚕豆根中活性成分与核心靶点间结合效应较强,结合能均小于-1.2 kcal/mol;Western blot结果表明,野蚕豆根提取物能明显上调p-PI3K蛋白及p-Akt蛋白的表达。本研究初步表明野蚕豆根提取物可通过激活PI3K-Akt信号通路从而发挥抗氧化作用,为后期野蚕豆根抗氧化活性的研究与应用提供理论依据及参考。
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32.
基于网络药理学及实验验证探究苗药虎掌草不同溶剂提取物抗前列腺癌活性及其作用机制
黄丽荣, 余 佳, 李 娇, 程 莎 骆 衡
天然产物研究与开发 2024, 36 (
7
): 1231-1241. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.7.016
摘要
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169
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运用网络药理学预测结合实验验证研究苗药虎掌草不同溶剂提取物的抗前列腺癌活性及其作用机制。分别以水、75%乙醇和乙酸乙酯提取虎掌草获得粗提物,通过MTT法体外检测3种溶剂提取物对前列腺癌细胞PC3增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响,评价提取物对PC3细胞的抑制作用;采用GC-MS分析乙酸乙酯提取物的化学成分;运用网络药理学分析虎掌草的活性成分及抗前列腺癌作用靶点,构建PPI网络,拓扑分析筛选核心靶点,通过GO生物功能富集和KEGG通路富集分析构建虎掌草抗前列腺癌的信号通路,预测潜在作用机制;利用RT-PCR检测虎掌草提取物对预测的TNF信号通路相关基因转录水平表达的影响,验证预测靶点,进一步分析作用机制。细胞实验表明,3种溶剂提取物对PC3细胞均具有较强的抑制增殖作用,且能显著诱导细胞凋亡(
P
<0.01);GC-MS和网络药理学结果表明白桦脂酸和虎掌草皂苷D为提取物的主要药效成分,检索得到与抗前列腺癌相关的靶点89个,进一步筛选得到核心靶点15个,涉及ALB、JUN、HSP90AA1等靶点;GO功能富集涉及142个生物过程、28个细胞组成和41个分子功能,KEGG通路富集分析交集靶点主要涉及TNF、TRP、NF-κB、癌症通路等。RT-PCR靶点验证实验表明3种溶剂提取物均能显著影响TNF信号通路关键基因的表达,证明了网络药理学预测机制的可靠性。本研究揭示了虎掌草水、75%乙醇和乙酸乙酯提取物具有较强的抗前列腺癌活性,白桦脂酸和虎掌草皂苷D为主要药效成分,其作用机制可能与调控TNF、TRP、NF-κB、癌症通路等有关。
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33.
山银花油GC-MS及LC-MS的全成分表征及体外抗炎和抗氧化活性研究
刘恃君, 陆玉爱, 李 利, 汤杨黔南, 林丽美, 谢明霞, 夏伯候
天然产物研究与开发 2023, 35 (
11
): 1842-1856. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2023.11.002
摘要
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167
)
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山银花是一种有价值的药用资源,但其油的化学成分和生物活性尚未深入研究。本文通过气相色谱-质谱仪联用法(GC-MS)及超高效液相色谱-高分辨质谱联用(UHPLC-QE-MS)对超临界CO2萃取法得到的山银花油进行系统的化学成分表征,并探讨其体外抗氧化及细胞抗炎能力等生物活性。GC-MS共鉴别出66种化合物,主要为脂肪酸类、甾醇类和烷烃类化合物。UHPLC-QE-MS在正负离子模式下分别鉴别出83和71种化合物,主要为萜类、黄酮类等化合物。抗氧化结果表明山银花油清除ABTS自由基能力呈良好的剂量依赖性,DPPH自由基的IC
50
值为3.49 mg/mL。同时抗炎实验表明山银花油可显著抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)炎性因子IL-6(P<0.05)和NO(
P
<0.05)的释放,发挥抗炎作用。以上结果表明,山银花油化学成分复杂多样,是一种具有较优抗炎作用的天然活性来源,且在食品医药中有较好的开发和应用价值。
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34.
滇产南方红豆杉枝叶中紫杉烷二萜化学成分及其骨髓瘤细胞毒活性研究
刘 林, 黄建宜, 郭 峰, 臧浩景, 郝小江, 邸迎彤
天然产物研究与开发 2024, 36 (
8
): 1320-1329. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.8.005
摘要
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164
)
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为了研究滇产南方红豆杉中紫杉烷二萜类成分及其骨髓瘤细胞毒活性,运用正相、反相以及排阻色谱等分离手段对南方红豆杉枝叶提取物的化合物进行分离和纯化,通过NMR等波谱手段鉴定化合物结构,并采用CCK-8法分析化合物体外抑制NEK2过表达骨髓瘤细胞增殖作用。从该植物中分离鉴定了16个紫杉烷二萜类化合物,分别为13-肉桂酰基-1-脱羟基巴卡丁Ⅳ(
1
)、紫杉素(
2
)、5
α
-桂皮酰氧基-9
α
,10
β
,13
α
-三乙酰氧基紫杉-4(20),11-二烯(
3
)、紫杉宁E(
4
)、hongdoushan A(
5
)、11-diene-2
α
,5
α
,9
α
,10
β
,13
β
-pentol-2
α
,9
α
,10
β
,13
α
-tetraacetate-5
α
-cinnamate(
6
)、taxezopidine H(
7
)、紫杉素 B(
8
)、taxuyunnanine C(
9
)、1-deoxybaccatin VI(
10
)、19-羟基巴卡丁III(
11
)、巴卡丁III(
12
)、7,9,13-三去乙酰基巴卡丁VI(
13
)、10-脱乙酰基巴卡丁 III(
14
)、紫杉醇(
15
)、7-表紫杉醇(
16
),其中化合物
1
为新化合物,化合物
5
、
13
为首次从南方红豆杉中分离得到,化合物
2
、
6
、
7
、
11
有明显的抑制NEK2过表达骨髓瘤细胞增殖作用(IC
50
=24.0、23.5、26.1、18.3 μmol/L),化合物
16
的抑制作用尤为显著(IC
50
=0.6 μmol/L)。
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35.
白术内酯Ⅱ逆转M2型巨噬细胞极化调控PDL1表达抑制A549细胞迁移
蒋宗蓥, 赵云辉, 张云亭, 郑 一, 王建光, 刘羽茜, 王艳杰
天然产物研究与开发 2023, 35 (
11
): 1857-1863. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2023.11.003
摘要
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161
)
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探究白术内酯Ⅱ(atractylenolideⅡ,AT-Ⅱ)对M2型巨噬细胞极化与A549细胞迁移能力的影响,并分析其潜在机制。利用PMA将THP-1细胞诱导成M0巨噬细胞,然后加入IL-4和IL-13继续诱导为M2型巨噬细胞。利用Transwell小室将M2型巨噬细胞与A549细胞共培养,分别给予0、2.5、5 μmol/L的AT-Ⅱ进行作用。采用MTT实验测定共培养条件下AT-Ⅱ对A549细胞活力的影响;采用Real-time PCR检测M2型巨噬细胞Arg-1的 mRNA表达水平;采用ELISA检测共培养体系中TNF-α、IL-1β的含量;采用WB检测A549细胞TLR4、p-p65、NF-κB(p65)、PDL1的蛋白表达水平;采用划痕实验检测A549细胞的迁移能力。结果显示,共培养条件下,与对照组相比,实验组(2.5、5 μmol/L)A549细胞活力降低(2.5 μmol/L组
P
>0.05、5 μmol/L组
P
<0.01);M2型巨噬细胞特异性基因Arg-1的mRNA表达水平显著降低(
P
<0.01);M1型巨噬细胞相关炎性因子TNF-α、IL-1β含量增多但无显著差异(
P
>0.05);A549细胞TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白TLR4、p-p65、NF-κB(p65)蛋白表达水平降低(
P
<0.01);A549细胞PDL1蛋白表达水平显著降低(
P
<0.01),A549细胞迁移能力下降。以上结果表明,AT-Ⅱ可以逆转M2型巨噬细胞极化,抑制A549细胞TLR4/NF-κB信号通路降低PDL1的表达水平,从而抑制肺癌细胞的迁移。
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36.
酸豆外果皮黄酮类成分及其抗氧化活性评价
申子佳, 陈飞龙, 贾朝玉, 李大山, 张庆芝, 李维熙, 王文静
天然产物研究与开发 2023, 35 (
11
): 1877-1886. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2023.11.005
摘要
(
161
)
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为了研究酸豆外果皮成分及其抗氧化活性,采用现代色谱分离技术从酸豆(
Tamarindus indica
Linn.)外果皮丙酮提取物中分离和纯化得到18个黄酮类化合物,通过核磁共振波谱数据对它们进行鉴定,分别为木犀草素(
1
)、7,3′,4′-三羟基黄酮(
2
)、芹菜素(
3
)、7,4′-二羟基黄酮(
4
)、7,4′-二羟基-3′-甲氧基黄酮(
5
)、紫云英苷(
6
)、槲皮素(
7
)、山柰酚(
8
)、金合欢素(
9
)、圣草酚(
10
)、柚皮素(
11
)、紫铆素(
12
)、二氢山柰酚(
13
)、5,7,3′,5′-四羟基二氢黄酮(
14
)、5,6,7,4′-四羟基二氢黄酮(
15
)、3,5,7,3′,5′-五羟基二氢黄酮醇(
16
)、儿茶素(
17
)、表儿茶素(
18
)。10个化合物(
2
、
4
~
6
、
9
、
11
、
13
~
16
)为首次从该属植物中分离得到;采用ORAC法体外抗氧化活性测定,发现酸豆外果皮的4份萃取物及9个化合物(
1
、
2
、
7
~
10
、
12
、
13
、
17
)有较好的抗氧化活性。
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37.
白及中的化学成分鉴定及对金葡菌的抑制机理研究
罗 芳, 俞 昳, 张琳晗, 陆梅芬, 陈小明
天然产物研究与开发 2023, 35 (
11
): 1894-1901. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2023.11.007
摘要
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161
)
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研究白及中的化学成分及对金葡菌的抑制机理。对白及成分进行色谱分离纯化,通过NMR对化合物进行结构鉴定,并用微量肉汤稀释法测试化学成分对金黄色葡萄球菌的抗菌作用。通过考察金黄色葡萄球菌的生长曲线、胞外碱性磷酸酶含量、DNA泄漏程度、细胞壁和细胞膜的完整性的变化探究白及中活性成分的抑菌机制。本研究从该植物中分离鉴定出10个化合物,分别为shancidin(
1
)、coelonin(
2
)、lusianthridin(
3
)、orchinol(
4
)、isoshancidin(
5
)、blestriarene A(
6
)、(
E
)-3-(4-hydroxyphenyl) acrylic acid(
7
)、3-phenylpropanoicacid(
8
)、ethyl 2-(4-hydroxyphenyl) acetate(
9
)、ethyl 2-(4-ethylphenyl) acetate(
10
)。其中,化合物
7
~
10
为首次从该植物种中分离得到。此外,化合物
6
有着显著的抑菌效果,最小抑菌浓度在10 μg/mL(阳性药物阿莫西林0.8 μg/mL),它通过破坏金黄色葡萄球菌膜结构,导致碱性磷酸酶和DNA泄漏,从而导致细菌死亡。化合物
6
可通过破坏细胞壁和细胞膜发挥抗菌作用机制。
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38.
草果果实的化学成分及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究
吕福杰, 路继刚, 范在举, 邓爱霞
天然产物研究与开发 2023, 35 (
11
): 1887-1893. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2023.11.006
摘要
(
160
)
PDF(pc)
(773KB)(
27
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本研究通过系统分离探索了中药草果果实的化学成分。采用多种柱色谱手段对其乙醇提取物进行分离纯化,通过波谱法鉴定化合物的结构并通过PNPG法测定化合物对
α
-葡萄糖苷酶抑制活性。从中药草果果实的乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位分离鉴定出11个化合物,分别为(
R
)-1-(1-ethoxypropyl)-3,5-dimethoxyphenol(
1
)、(
R
)-1-(3,4,5-trimethoxyphenyl)propan-1-ol(
2
)、3-甲氧基-4-羟基苯丙酮(
3
)、香草乙酮(
4
)、2,6二甲氧基-4甲基苯酚(
5
)、香兰素(
6
)、4-萜烯醇(
7
)、methyl (9
S
,10
R
,11
E
,13
R
,15
Z
)-9,10,13-trihydroxyoctadeca-11,15-dienoate(
8
)、methyl (9
S
,10
R
,11
E
,13
R
)-9,10,13-trihydroxyoctadec-11-enoate(
9
)、amomutsaoko A(
10
)以及renealtin A(
11
)。其中化合物
1
为酚类化合物,是作为天然产物首次报道,化合物
10
和
11
具有强于阿卡波糖的
α
-葡萄糖苷酶抑制活性。
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39.
基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术的百蕊颗粒入血成分研究
周思倩, 方 艳, 谭金桃, 王雅静, 吴 娟, 邵 乐, 龙红萍
天然产物研究与开发 2024, 36 (
2
): 243-251. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.2.007
摘要
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160
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采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)技术辨析百蕊颗粒灌胃大鼠后的原型成分和代谢产物,并研究其主要体内代谢过程。大鼠口服给药百蕊颗粒后,采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术采集血清样本数据,正、负离子模式下同时扫描,结合前期体外化学成分质谱数据以及提取各化学成分的精确质荷比等信息对百蕊颗粒在大鼠体内的原型成分和代谢产物进行辨识研究。结果在大鼠体内中共检测到20个原型成分和10个代谢产物,其中原型成分包括生物碱类化合物6个,黄酮类化合物4个,有机酸类3个等其他化合物,主要代谢途径包括还原反应和水解反应、硫酸化反应和葡萄糖醛酸结合反应。该研究为揭示百蕊颗粒药效物质基础奠定了基础,也为其中成药的开发与利用提供应用价值。
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40.
杏叶防风的化学成分及抗炎活性研究(Ⅱ)
汪 洋, 薛靖怡, 雷 艳, 潘 洁, 杨 畅, 李勇军, 马 雪
天然产物研究与开发 2024, 36 (
8
): 1357-1367. DOI:
10.16333/j.1001-6880.2024.8.009
摘要
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为了研究杏叶防风(
Pimpinella candolleana
)的化学成分及其抗炎活性,采用正相硅胶、ODS反相硅胶、D101大孔吸附树脂及MCI树脂等多种色谱方法对杏叶防风70%乙醇提取物部位进行了分离,并通过与文献对比波谱数据鉴定化合物结构。体外培养小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW 264.7)细胞,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW 264.7细胞建立氧化损伤模型,利用一氧化氮(NO)试剂盒检测NO浓度,评价各化合物的抗炎活性。从该植物中分离得到25个黄酮类化合物,分别鉴定为1-hydroxy-2,3,4,7-tetramethoxyxanthone(
1
)、1-hydroxy-2,3,4,6-tetramethoxyxanthone(
2
)、bellidifolin(
3
)、desmethylbellidifolin(
4
)、当药醇苷(
5
)、日本当药黄素(
6
)、异日本獐牙菜素(
7
)、木犀草素-7-
O-β-D
-芸香糖苷(
8
)、luteolin-7-
O-β-D
-glucopyranosyl-(1→6)-[6′′′-
O
-caffeoyl]-
β-D
-glucopyranoside(
9
)、木犀草素-4′-
O-β-D
-葡萄糖苷(
10
)、木犀草素-6-
C-β-L-
岩藻糖苷(
11
)、荭草素(
12
)、异荭草素(
13
)、槲皮素-3-
O-β-D
-半乳糖苷(
14
)、芹菜素(
15
)、quercetin-3-
O-β-D
-(6″-caffeoylgalactoside)(
16
)、小麦黄素-7-
O-β-D
-葡萄糖苷(
17
)、葛根素(
18
)、牡荆素(
19
)、商陆素-3-
O-β-D
-葡萄糖苷(
20
)、商陆素-3-
O-β-D
-半乳糖苷(
21
)、鼠李素-3-
O-β-D
-半乳糖苷(
22
)、鼠李素-3-
O-β-D
-葡萄糖苷(
23
)、异鼠李素-3
O-β-D
-葡萄糖苷(
24
)、柯伊利素-7-
O-β-D
-葡萄糖苷(
25
)。其中,化合物
13
~
15
首次从杏叶防风中分离得到,化合物
1
~
12
、
16
~
25
首次从茴芹属植物中分离得到;生物活性测定结果表明,化合物
1
~
3
、
6
~
10
、
12
~
15
、
17
~
20
、
23
、
25
能抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞的NO释放,显示出一定的抗炎活性。
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